Chloramphenicol ist ein bakteriostatisches Breitspektrumantibiotikum, das den Prozess der Proteinsynthese in einer mikrobiellen Zelle unterbricht (besitzt eine gute Lipophilie, dringt durch die bakterielle Zellmembran ein und bindet reversibel an die Untereinheit) 50S bakterielle Ribosomen, in denen die Bewegung von Aminosäuren zu wachsenden Peptidketten verzögert ist, was zu einer Verletzung der Proteinsynthese führt). Es ist aktiv gegen die meisten Stämme von gram-positiven und gram-negativen Bakterien, Erreger von eitrigen, Darminfektionen, Meningokokken-Infektion: Escherichia coli, Shigella dysenteria, Shigella flexneri spp., Shigella boydii spp., Shigella sonnei, Salmonella spp. ( in t.ch Salmonella typhi, Salmonella paratyphi), Staphylococcus spp., Streptococcus spp. (inkl. Streptococcus pneumoniae), Neisseria meningitides, Neisseria gonorrhoeae, eine Reihe von Stämmen Proteus spp., Burkholderia pseudomallei, Rickettsia spp., Treponema spp., Leptospira spp., Chlamydia spp. (inkl. Chlamydia trachomatis), Coxiella burnetii, Ehrlichia canis, Bacteroides ffagilis, Klebsiella pneumoniae, Haemophilus influenzae.
Er wirkt auf säurefeste Bakterien (inkl. Mycobacterium tuberculosis), Anaerobier, Methicillin-resistente Stämme von Staphylokokken, Acinetobacter, Enterobacter, Serratia marcescens, Indol-positive Stämme Proteus spp., Pseudomonas aeruginosa spp., Protozoen und Pilze. Die Stabilität von Mikroorganismen gegen Chloramphenicol entwickelt sich langsam.