Chloramphenicol ist ein bakteriostatisches Breitspektrumantibiotikum, das den Prozess der Proteinsynthese in einer mikrobiellen Zelle unterbricht (besitzt eine gute Lipophilie, dringt durch die bakterielle Zellmembran ein und bindet reversibel an die Untereinheit) 50S bakterielle Ribosomen, in denen die Bewegung von Aminosäuren zu wachsenden Peptidketten verzögert ist, was zu einer Verletzung der Proteinsynthese führt).
Es ist aktiv gegen viele grampositive und gramnegative Bakterien, Erreger von eitrigen, Darminfektionen: Escherichia coli, Shigella dysenteria, Shigella flexneri, Shigella boydii., Shigella sonnei, Salmonella spp. (inkl. Salmonella typhi, Salmonella paratyphi), Staphylococcus spp., Streptococcus spp. (inkl. Streptococcus pneumoniae), Neisseria gonorrhoeae, eine Reihe von Stämmen Proteus spp., Burkholderia pseudomallei, Rickettsia spp., Treponema spp., Leptospira spp., Chlamydia spp. (inkl. Chlamydia trachomatis), Coxiella burnetii, Ehrlichia canis, Bacteroides fragilis, Klebsiella pneumoniae, Haemophilus influenzae.
Er wirkt auf säurefeste Bakterien (inkl. Mycobacterium tuberculosis), Anaerobier, Methicillin-resistente Stämme Staphylococcus spp., Acinetobacter spp., Enterobacter spp., Serratia marcescens, Indol-positive Stämme Proteus spp., Pseudomonas aeruginosa spp., Protozoen und Pilze.
Die Stabilität der Mikroorganismen entwickelt sich langsam.